实验室无菌操作台

一、关于超净工作台上的无菌操作,非专业人士勿进

和你的专业不一样，不过也用超净台

1、实验室工作时是不能戴手表的，甚至项链、戒指、耳环等在工作期间应取下，否则会带来安全隐患。而袖子根本不应该伸入到生物安全柜里呀，起码你要穿上洁净工作服吧？事实上只要你的手伸进去就会在一定程度上影响到了气流，即可能造成污染，因此要小心操作，缓慢谨慎，切不突然可有太大动作。

2、当然会，染菌部分对无菌部分污染。

3、这个不好说，似乎没有说这时候一定要**的，不过你严格的话就消一消吧，不过我是不消的，因为太麻烦了，时间的延长和操作的烦琐其实也对实验不好。

4、镊子和手术刀应该放在容器中**后使用，而不是用75%酒精**，使用过程中手只可接触柄部，使用完后就不能重复使用了，下一次操作应换一个镊子或手术刀。

5、**过程应该用容器装好**，**后连容器一起拿到实验室再把这些东西拿出来放在超净台中，外壁不用擦。

6、这个要靠自己的感觉了，接种环大约20秒，可以在未接种的部位碰一下冷却，这样就不用等了。镊子和刀片你是用灼烧的？应该用**好的一次*使用。

7、这个应该更照顾你的操作，放在你的右手易及之处。

8、无菌操作就体现在这些细微的环节上，你不盖或许在绝大多数情况下无影响，但是绝**对的无菌条件是不可能保证的，说不定1000个样品中就有1个被污染了呢？

二、使用无菌实验室需要注意什么

1、实验进行前，无菌室及无菌操作台以紫外灯照射30-60分钟**，以70%的酒精擦拭无菌操作台面，并开启无菌操作台风扇运转10分钟后，才开始实验操作。

2、小心取用无菌的实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。

3、工作人员应注意自身安全，需穿戴实验衣和手套后才能进行实验。对于来自人类或****的**株应特别小心的操作，并选择适当等级的无菌操作台。操作过程中，应避免引气溶胶类物质的产生，小心***品，例如DMSO及TPA等，并避免尖锐**的伤害等。

4、按种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧**，待冷却后，方可接种培养物。

5、无菌操作工作区域应保持清洁、宽敞必要物品齐全。例如：试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其他实验用品用完应及时移出，以便于让气流更流通。实验用品以70%的酒精擦拭后才能带入无菌操作台内。实验操作应在台面的中央无菌区域，不要在边缘的非无菌区域操作。

三、微生物实验无菌操作台如何**

开通风了么？一定在做实验的过程中一直开风，否则够不成无菌环境，外面的微生物也会跑到通风橱里。

紫外灯照射时间够么？30MIN

放培养基的时候，周围有同学走动，或者说话的情况么？说话的话也会带来杂菌。

放培养基之前，打开培养皿的手确认是酒精**的么？

以上每点做到就没有问题了，原来我们实验室是做**的，实验室满屋子都是孢子，熏蒸过也不好使，不过在通风橱接菌的时候注意以上的问题，从来也没有染过杂菌

四、关于实验室抽虑**的操作

问：*近要做一些培养基，有一些糖类需要过滤**，但不知道怎么操作，还需要什么辅助设备？

答：你只要有滤膜和配套的过滤器就可以了，一般在超净工作台上进行。滤膜用0.22微米或0.45微米两种规格，指的是滤膜的孔径大小吧。一般0.22就够了！

答：如果溶液的量比较大，超过500ml，可以采用已**的抽滤瓶，预先垫好0.22um的滤膜。抽滤瓶**前要检查封口用纱布或棉花堵牢，使用时，不用在无菌室中进行，只要保证收集瓶无菌状态就可以。抽滤后，过滤好的溶液在无菌条件下倒进已**的空试剂瓶中。

如果用小量的溶液过滤，无菌室内用一次****和一次*0.22um滤膜（millipore或pall都有卖）就可以。

答：看过滤的量，如果量小，用***加滤器、0.22微米滤膜过滤，滤器加上滤膜后盖紧，稍旋松，饭盒密封100度蒸馏水煮沸30分钟**，用来承接无菌糖水的瓶需高压。用时在无菌操作台上操作，并先旋紧滤器，注意滤器外流下去的哪怕一滴也会造成染菌；过滤应该是费力的，如果感觉很轻松，则滤膜已破。0.45微米的滤膜一般用于两次过滤的**次，以防止0.22堵塞。***，若能高压更好些。

如果量大，正压可用蠕动泵接皮管接不锈钢滤器大张滤膜，这些都是要高压的。负压可用抽滤。